又称灭活疫苗或灭能疫苗。是指用标准的强毒菌种、毒种或免疫原性良好的弱毒株，经人工大量培养后，用物理、化学的方法将其杀死(灭活)而制成的疫苗。该疫苗保持免疫原性，接种后能使动物产生特异性抵抗力，如猪口蹄疫灭活疫苗(O型)、鸡新城疫灭活疫苗等。由于死疫苗接种后病原微生物不能在动物体内繁殖，因此接种剂量较大，免疫期较短，需加入适量的佐剂以增强免疫效果。优点是研制、生产方便，使用安全，易于保存和运输。死疫苗由于所用佐剂不同，分为组织灭活苗、油佐剂灭活苗、氢氧化铝胶灭活苗和蜂胶灭活苗。

1.组织灭活苗：组织灭活苗是用患传染病的病死动物的典型病变组织或人工接种某种传染病的病变(鸡胚)组织，在密闭条件下经研磨、过滤，按一定比例稀释并加入灭活剂灭活后制备而成，该疫苗在特殊情况下，经政府批准后才能生产使用。

2.油乳剂灭活苗：是将收获的病毒培养物，经二乙烯亚胺(BEI)灭活后，超滤浓缩，将浓缩抗原液与精制矿物油佐剂混合乳化制成略带黏滞性的均匀乳状液，包括单相苗和双相苗两种。单相苗是油相与水相(抗原液)按一定比例制成的油包水乳剂(W/O)，双相苗是在单相苗的基础上，再与水相(加入土温-80)进一步乳化而成的外层是水相，内层是油相，中心为水相(W/O/W)的剂型，油相中除矿物油外还需加入乳化剂(司本-80)和稳定剂(硬脂酸铝)。油佐剂灭活苗的免疫效果好，免疫期也较长，双相苗比单相苗的抗体上升快，目前在生产中得到了广泛的应用。

3.氢氧化铝胶灭活苗：是将抗原经甲醛溶液灭活后加入氢氧化铝制成的。如猪丹毒铝胶灭活苗、鸡大肠杆菌病灭活苗等在生产中都起到了较好的免疫效果。

4.蜂胶灭活苗：该苗是将抗原经甲醛溶液灭活后，加入佐剂蜂胶混合制成，该苗安全可靠，快速高效，注射部位无肿胀、坏死、残留。