(一)器材用具的准备

人工授精用的器材用具主要有假阴道、输精器、阴道开张器、集精瓶、玻璃棒、镊子、烧杯、磁盘等。凡采精、输精及与精液接触的一切器材都要求清洁、干燥、消毒，存放于消毒柜内，柜内不再放其他物品。

安装假阴道时，要注意假阴道内部的温度和压力，使其与母羊阴道相仿。灌水量占内胎和外壳空间的1/2～2/3，以150～180毫升为宜。水温45～50℃，采精时内胎腔内温度保持在39～42℃。为保证一定的润滑度，用清洁玻璃棒蘸少许灭菌凡士林均匀涂抹在内胎前1/3处。通过气门活塞吹入气体，以内胎壁的采精口一端呈三角形为宜。

(二)采精

采精前应选好台羊，台羊的选择应与采精公羊的体格大小相适应，且发情明显。将台羊外阴道用2%来苏儿溶液消毒，再用温水冲洗干净并擦干。将公羊腹下污物擦洗干净。采精时采精人员必须精力集中，动作敏捷、准确。采精员蹲在母羊右后方，右手握假阴道，贴靠在母羊尾部，入口朝下，与地面呈35°～45°。当种公羊爬跨时，用左手轻托阴茎包皮，将阴茎导入假阴道中，保持假阴道与阴茎呈一直线。当公羊向前一冲时即为射精。随后采精员应随同公羊从台羊身上跳下时将阴茎从假阴道中退出。把集精瓶竖起，拿到处理室内，放出气体，取下集精瓶，盖上盖子，做好标记，准备精液检查。

(三)精液品质检查

对采出的精液首先通过肉眼和嗅觉检查，公羊精液为乳白色，略带腥味，肉眼可见云雾状运动，射精量0.8～1.8毫升，平均1毫升。其次通过显微镜检查精液的活率、密度大小及精子形态等情况。检查时以灭菌玻璃棒蘸取一滴精液，滴在载玻片上，加上盖片，置于400倍显微镜下观察。检查时温度以38～40 ℃为宜。全部精子都做直线运动的活率评为1分，80%做直线运动的活率评为0.8分，60%做直线运动的活率评为0.6分，其余依此类推。活率在0.8分以上方可用来输精。精子密度分四个等级：密、中、稀、无。“密”为视野中精子密集、无空隙，看不清单个精子运动;“中”为视野中精子间距相当于1个精子的长度，可以看清单个精子运动;“稀”为视野中精子数目较少，精子间距较大;“无”为视野中无精子。精子形态检查是通过显微镜检查精液中是否有畸形精子，如头部巨大、瘦小、细长、圆形、双头;颈部膨大、纤细、带有原生质滴;中段膨大、纤细、带有原生质滴等;尾部弯曲、双尾、带有原生质滴等。如精液中畸形精子较多，也不宜输精。

(四)精液的稀释

精液稀释一方面是为了增加精液容量，以便为更多的母羊输精;另一方面还能使精液短期，甚至长期保存起来，继续使用，且有利于精液的长途运输，从而大大提高种公羊的配种效能。精液在采好以后应尽快稀释，稀释越早，效果越好，因而采精以前就应配好稀释液。常用的稀释液见表4-1。

表4-1　常用的稀释液

新采集的精液温度一般在30℃左右，如室温低于30℃时，应把集精瓶放在30℃的水浴箱里，以防精子因温度剧变而受影响。精液与稀释液混合时，二者的温度应保持一致，在20～25℃室温和无菌条件下操作。把稀释液沿集精瓶壁缓缓倒入，为使混匀，可用手轻轻摇动。稀释后的精液应立即进行镜检，观察其活力。

精液的稀释倍数应根据精子的密度大小决定。一般镜检为“密”时精液方可稀释，稀释后的精液输精量(0.1毫升)应保证有效精子数在7 500万以上。

(五)精液的保存

精液保存按保存温度可分为常温(10～14℃)保存、低温(0～5℃)保存和冷冻(-196～-79℃)保存三种。

1.常温保存　用于常温保存的精液，其稀释液可用含有明胶的稀释液。稀释液配方RH明胶液为枸橼酸钠3克，磺胺甲基嘧啶钠0.15克，后莫氨磺酰0.1克，明胶10克，蒸馏水100毫升;明胶、牛奶液配方为牛奶100毫升，明胶10克。将稀释好的精液，盛于无菌的干燥试管中，然后加塞盖严、封蜡隔绝空气即可。该法保存48小时，活力为原精液的70%。

2.低温保存　低温保存要注意缓慢降温。可以将盛精液的试管外边包上棉花，再装入塑料袋内，然后放入冰箱中。一般此法可保存1～2天。

3.冷冻保存　将采得的精液用乳糖、卵黄、甘油稀释液按1∶(1～3)稀释后，放入3～5℃冰箱，经2～4小时降温平衡。然后在装满液氮的广口保温瓶上，放一光滑的金属薄板或纱网，距液氮1～2厘米，几分钟后待温度降到恒温时，将精液用滴管或细管逐滴滴在薄板或纱网上，滴完后经3～5分钟，用小勺刮取颗粒，收集后，立即放入液氮中保存。冷冻精粒在超低温条件下，可长年保存而不变质。

(六)输精

羊的输精最好使用横杠式输精架。地面埋两个木桩，木桩间距可根据母羊数量而定，一般可设2米，再在木桩上固定一根圆木(直径约6厘米);圆木距地面50厘米左右。输精母羊的后肋搭在圆木上，前肢着地，后肢悬空，可将几只母羊同时搭在圆木上输精。

输精前所有的输精器材都要消毒灭菌，输精人员手指甲应剪短磨光，洗净双手，并用75%乙醇消毒。对母羊外阴部用来苏儿溶液消毒，并用水洗净擦干，再将开膣器慢慢插入，寻找子宫颈口，之后轻轻转动90°，打开开膣器。子宫颈口的位置不一定正对阴道，但阴道附近黏膜颜色较深，容易找到。输精时，将吸好精液的输精器慢慢插入子宫颈口内0.5～1.5厘米处，将精液轻轻注入子宫颈内。注射完后，抽出输精器和阴道开膣器，随即消毒备用。输精量应保持有效精子数在7 500万以上，即原精液0.05～0.1毫升。只能进行阴道输精的母羊，其输精量应加倍。