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(一)采血法
    来源:辈宠网

犬可供采血的静脉有颈静脉、股静脉、隐静脉、前臂皮下(桡侧皮)静脉等。静脉穿刺时应注意,不要刺伤静脉,特别是反复操作时。采血前要局部剪毛、消毒。将犬保定,用止血带于采血局部的近心端将血管勒紧,使其怒张而显露明显。将局部皮肤绷紧,以防静脉滑动,用灭菌注射器采取血液2~5毫升。一般血液检测时可用EDTA抗凝,进行生物化学及酶的测定时,则需要肝素抗凝,需要收集血清时,则不能使用抗凝剂。当采取血液不畅时,应注意是否静脉虚脱、针头阻塞、循环障碍、血肿形成或针刺破静脉壁等。

1.用于血液学测定的血液的采集

肝素的抗凝效果可达1~3天,之后便凝固。血涂片制作应在采血后立即进行,用EDTA抗凝的血液可以制作血涂片,但要求采血后立即进行,否则,细胞的形态会发生变化。最实用的方法是利用留在采血针头中的血液进行涂片,因其未与抗凝剂接触。用肝素抗凝的血液不能用于制作血涂片。抗凝剂与血液的比例不当会导致血浆和红细胞间水分的转移,使Hb值发生变化。少量血液放入较大的容器中也会导致测定结果的误差,这是由于血浆水分蒸发及细胞附着于容器壁所致。

在推迟检查时,应将血液标本进行冷藏。白细胞、红细胞、Hb及PCV的测定,应在采血后的24小时内进行,而血小板测定应在采血后1小时内进行。

干燥而未固定的血涂片应在24~48小时内进行普通的染色,当染色推迟很长时间时,则应用纯甲醇进行固定5分钟,可在较长的时间内保持稳定。未固定的血涂片绝不能放入冷藏室内,否则由于凝缩等而不能使用。未固定的标本应防止被苍蝇等昆虫舔食,涂片的面朝下或放入有盖的容器内。

2.用于血液化学测定的标本的采集

多数的血液化学测定需要血清,因此不需要添加抗凝剂。用清洁干燥的试管收集血液,血液凝固收缩后便析出血清。为收集到更多的血清,需在高温或体温条件下保存血样,而在冷藏条件下则血清析出很少。血液凝固后用细玻璃棒在血饼边缘进行剥离,或在管外叩击使试管与血块分离,室温下1小时便可析出血清,继而进行离心沉淀。通常血清析出量约为全血的1/3。

血浆也可以进行多种生物化学检查。使用血浆的优点是不用等待血液凝固和血饼收缩,而是直接可以获得。但其中混有抗凝剂,成为多种血液生物化学检测的障碍,且血浆比血清稍浑浊。除去血浆中的纤维蛋白和抗凝剂,则血浆成分和血清几乎一致。生化检查用血浆或全血时,抗凝剂可选用肝素。进行pH值和血液气体分析时,最好用肝素抗凝。EDTA抗凝血可用于生化检测,但不能用于电解质的测定,这是由于电解质从细胞中释出所致。

血清析出后要移入清洁干燥的试管中保存。血浆样品应尽快进行测定 (见表8),否则血浆中的细胞成分等的析出,会影响测定结果 (Mg、K、P及转氨酶等也如此)。

表8 临床检查用血液材料

检查项目血液处理
血pH值、血液气体

血糖

电解质

血液学

其他分析

肝素抗凝,动脉血液为佳,厌氧下采血立即进行测定

血样中加入氟化钠以防止葡萄糖分解

血清或肝素化血浆,不能使用EDTA或橼酸等抗凝剂

EDTA抗凝,除血涂片外,也可以使用肝素

最好是血清,有时可使用肝素化血浆、EDTA血浆等

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