犬脑脊液采取的最佳部位是环椎后头关节的槽内。所需器械有灭菌试管、18～20号针头、5.4～13.5厘米脊髓针、脊髓液压力计、三通、5毫升注射器。

在麻醉条件下腹卧或侧卧保定，在头后隆起到环椎翼间除毛，将术区暴露于桌台的一端，使头部向腹侧弯曲，以利于头骨与环椎分离。

进针点在两侧环椎翼横突连线与正中线的交点。与颈背线成垂直进针，边进针边抽出内芯，观察有无脑脊液流出。在穿过脊硬膜前可感觉到阻力，可作为判定的一个标准，但并不是必然存在的，固应随时拔出内芯观察，以防针尖损伤脊髓。如果针尖抵到骨上则应调整进针方向。当吸出的不是脑脊液，而是血液时，则为刺破脊椎静脉丛的血管分支所致，这时应更换新的穿刺针。如果脑脊液中混有新鲜的血液时，应在24小时后再采一次。

当穿刺针流出脑脊液后，应立即进行脑压的测定，然后采集2毫升脑脊液，装入灭菌的容器内，观察其色泽、澄清度、细胞总数、蛋白质、氯、葡萄糖、细胞分类记数及培养等。

脑脊液穿刺后应观察5～7天，以确定有无感染。