在进行皮肤真菌的培养时，应注意选择取样的部位及抑制其他细菌的繁殖。局限性皮肤疾病时，要在其边缘用酒精清洁，用手术刀将皮痂、毛及角质层刮下来，将其放于培养皿的中央，移至培养基的表面，不要密闭瓶塞，在室温下培养1～4周。

如果皮肤病灶分散，且很不明显时，应使用灭菌牙刷刷可疑的部位，在其表面用力摩擦，取其毛、痂、浮皮等。将牙刷与陪替氏培养皿表面压紧，并将采样移入培养基或将该牙刷在灭菌的培养皿中轻轻叩打，收集皮渣，并将其做培养。

这种方法可用于分离皮肤丝状菌及念珠菌。可以使用下面两种培养基，一种是为防止细菌及真菌的污染而在每毫升沙堡罗培养基中加入0.5克的放线菌酮及0.05克的氯霉素; 另一种是新的选择性培养基Dermatophyte Test media (DTM)，其中加入了从黄色到红色的pH指示剂 (酚红)，皮肤丝状菌在碱性反应的几天内呈红色，而大部分非病原性真菌呈黄色。这种培养基上生长的真菌要比沙堡罗培养基快。深在性丝状菌的培养是相当困难的。