犬细小病毒病是由犬细小病毒2型引起的犬的一种烈性传染病。临诊表现以急性出血性肠炎和非化脓性心肌炎为特征。
1978年,在美国、澳大利亚和欧洲几乎同时分离获得犬细小病毒 (CPV)。我国1982年证实有本病发生,目前已广泛流行于全国各地,是危害我国养犬业最为严重的传染病之一。
【病原学】 犬细小病毒2型(Canine parvovirus2,CPV-2) 在分类上属细小病毒科,细小病毒属。病毒粒子呈圆形,直径21~24 nm,呈20面体立体对称,无囊膜,病毒核衣壳由32个长3~4 nm的壳粒组成。病毒基因组为单分子线状单股DNA,大小5.2kb。
CPV-2与原先在犬发现的CPV-1不同,CPV-1又名犬微小病毒 (Minute virus of ca-nines),无明显致病性。一般所说的犬细小病毒,均指CPV-2。
CPV-2在抗原性上与猫全白细胞减少症病毒 (FPV) 和水貂肠炎病毒 (MEV) 密切相关。CPV-2在4℃条件下可凝集猪和恒河猴的红细胞,对其他动物如犬、猫、羊等的红细胞不发生凝集作用。CPV-2对猴和猫红细胞,无论是凝集特性还是凝集条件均与猫全白细胞减少症病毒 (FPV) 不同,由此可区别CPV-2与FPV。与多数细小病毒不同,CPV-2可在多种细胞培养物中生长,如原代猫胎肾、肺细胞,原代犬胎肠细胞、MDCK细胞、CRFK细胞以及FK81细胞等。
CPV-2自发现20多年来,出现了抗原性漂移,目前有a、b两个亚型,2a在1979年出现,2b则始于1984年前后。二者致病性未见差异。
CPV-2对多种理化因素和常用消毒剂具有较强的抵抗力。在4~10℃存活180天,37℃存活14天,56℃存活24h,80℃存活15 min。在室温下保存90天感染性仅轻度下降,在粪便中可存活数月至数年。甲醛、次氯酸钠、β-丙内酯、羟胺、氧化剂和紫外线均可将其灭活,但对氯仿、乙醚等有机溶剂不敏感。
【流行病学】
1.易感动物 犬是主要的自然宿主,其他犬科动物,如郊狼、丛林狼、食蟹狐和鬣狗等也可感染。豚鼠、仓鼠、小鼠等实验动物不感染。不同年龄、性别、品种的犬均可感染,但以刚断乳至90日龄的犬较多发,病情也较严重,尤其是新生幼犬,有时呈现非化脓性心肌炎而突然死亡。纯种犬比杂种犬和土种犬易感性高。
2.传染源 病犬是主要的传染来源。感染后7~14天粪便可向外排毒,粪便中的病毒滴度TCID50常达109/g。发病急性期,病犬的呕吐物和唾液中也含有病毒。无症状的带毒犬也是重要的传染源。人、苍蝇和蟑螂等可成为CPV-2的机械传播者。
3.传播途径 主要是由病犬与健康犬直接接触或经污染的饲料和饮水通过消化道感染。4.流行形式及因素 犬感染CPV-2发病急,病死率高,常呈暴发性流行。一年四季均可发生,但以冬春季多发。天气寒冷,气温骤变,饲养密度过高、拥挤、并发感染等可加重病情和提高病死率。
【临诊症状】 本病最初流行时以心肌炎及白细胞减少与肠炎综合征为主。目前因普遍存在母源抗体,已很少见心肌炎型。CPV-2感染在临诊上表现各异,但主要可见肠炎和心肌炎2种病型。有时某些肠炎型病例也伴有心肌炎变化。
1.肠炎型 自然感染潜伏期7~14天,人工感染3~4天。病初48 h,病犬抑郁、厌食、发热至40~41℃和呕吐,呕吐物稀薄、胆汁样或带血。起初粪便呈灰色或黄色,6~12 h后开始腹泻,呈血色或含有血块。胃肠道症状出现后24~48 h表现脱水和体重减轻等症状。粪便中含血量多少,直接关系着病的预后,较少则表明病情较轻,恢复的可能性较大。在呕吐和腹泻后数日,由于胃酸倒流入鼻腔,导致黏液性鼻漏。在病的过程中常发生肠套叠。
2.心肌炎型 多见于28~42日龄幼犬,常无先兆性症候,或仅表现轻度腹泻,继而突然衰弱,呼吸困难,脉搏快而弱,心脏听诊出现杂音,心电图发生病理性改变,短时间内死亡。
【病理变化】
1.肠炎型 自然死亡犬极度脱水、消瘦,腹部蜷缩,眼球下陷,可视黏膜苍白。肛门周围附有血样稀便或从肛门流出血便。有的病犬从口、鼻流出乳白色水样黏液。血液黏稠呈暗紫色。小肠以空肠和回肠病变最为严重,内含酱油色恶臭分泌物,肠壁增厚,黏膜下水肿。黏膜弥漫性或局灶性充血,有的呈斑点状或弥漫性出血。大肠内容物稀软,酱油色,恶臭。黏膜肿胀,表面散在针尖大出血点。结肠肠系膜淋巴结肿胀、充血。肝肿大,色泽红紫,散在淡黄色病灶,切面流出多量暗紫色不凝血液。胆囊高度扩张,充盈大量黄绿色胆汁,黏膜光滑。肾多不肿大,呈灰黄色。脾有的肿大,被膜下有黑紫色出血性梗死灶。心包积液,心肌呈黄红色变性状态。肺呈局灶性肺水肿。咽背、下颌和纵隔淋巴结肿胀、充血。胸腺实质缩小,周围脂肪组织胶样萎缩。膈肌呈现斑点状出血。
2.心肌炎型 肺脏水肿,局部充血、出血,呈斑驳状。心脏扩张,左侧房室松弛,心肌和心内膜可见非化脓性坏死灶,心肌纤维严重损伤,可见出血性斑纹。
【诊断】 根据流行特点,结合临诊症状和病理变化可以做出初步诊断。确诊则需要进行病毒的分离鉴定或血清学检查。
1.病毒分离与鉴定 将病犬粪便材料处理后接种猫肾、犬肾等易感细胞。CPV-2属自主性细小病毒,复制时需要细胞分裂期产生的一种或多种因子。因此,必须将含毒样品加入胰蛋白酶消化的新鲜细胞悬液中同步培养。通常可采用免疫荧光试验或血凝试验鉴定新分离病毒。
2.电镜和免疫电镜观察 病初粪便中即含有大量CPV-2粒子,因此可用电镜负染CPV-2粒子。为与非致病性犬微小病毒(MVC)和犬腺病毒(CAAV)相区别,可于粪液中加适量CPV阳性血清进行免疫电镜观察。
3.血凝和血凝抑制试验 由于CPV-2对猪和恒河猴红细胞具有良好的凝集作用,应用血凝试验可很快测出粪液中的CPV。
4.免疫酶标诊断技术 国内已研制成功犬细小病毒酶标诊断试剂盒,可在30 min内检出病犬粪便中的CPV-2,达到了国外同类产品的水平。
5.血清学诊断方法 目前已建立多种血清学诊断方法,其中包括血凝和血凝抑制试验、乳胶凝集试验、酶联免疫吸附试验、免疫荧光试验、对流免疫电泳、中和试验等,可依据各自的实验室条件选择适宜的检测方法。
【防控措施】 本病发病迅猛,应采取综合性防控措施,及时隔离病犬,对犬舍及用具等用2%~4%的氢氧化钠溶液或10%~20%漂白粉液反复消毒。
疫苗免疫接种是预防本病的有效措施。为了减少接种手续,目前多倾向于使用联苗。如美国生产的CPV—CDV—CAV—1—CAV—2—CPIV和犬钩端螺旋体六联苗以及国内研制的CDV—CPV—CAV—1—CPIV和狂犬病五联苗。
CPV-2感染发病快,病程短,临诊上多采用对症治疗。近年来,国内已研制成功治疗CPV-2感染的犬细小病毒单克隆抗体,在发病早期胃肠道症状较轻时,免疫治疗效果显著,结合对症治疗措施可大大提高治愈率,目前已广泛应用。