二、血液学检查

(一)血样的采集

根据检验需要决定采血量。采血时可选用静脉采血和心脏采血。

静脉采血：选用部位有颈静脉、前臂头静脉、后肢隐外静脉、隐内静脉等。少量采血时可在耳、唇、足垫等处针刺取数滴。采血时，将宠物侧卧保定，局部剪毛消毒，宠物主或助手握住采血部的上方，或用血带结扎，待静脉血管怒张显露后，用5～7号针头或小儿头皮针，以与皮肤呈45°角刺入皮下，刺入血管后再沿血管向行推入0.5～1cm，连接干燥消毒的注射器抽出血液。

心脏采血： 必要时，可在胸右侧第4或第5肋间的胸骨之上，肘突水平线上，进行心穿刺。采血时用长约5cm的乳胶管连接在注射器上，手持针头，垂直进针，边刺边回抽注射器活塞，将血采出。

(二)血液的抗凝

自静脉或心脏采出的血液，一般可装在小试管中或带橡皮塞的抗生素小瓶中。不需要血清检验项目，如血常规检验及全血分析，应事先加入一定比例的抗凝剂。常用的抗凝剂有下列几种：

乙二胺四乙酸二钠(EDTA二钠)： 为常用抗凝剂之一，其优点是对血细胞形态影响很小，可防止血小板聚集，在室温下数小时内，对血红蛋白、血小板记数、血片染色均无不良影响。通常配成10%溶液，每2滴可使5ml血液不凝固。但不能用于输血。

草酸钾： 优点为溶解度大，抗凝作用强。缺点为能使红细胞缩小，不适用于红细胞压积的测定。用量： 取草酸钾结晶少许(约10mg)置于试管或小瓶中，采血5ml，轻轻混匀即可。或用10%草酸钾液0.1ml，分装于小瓶中，置烘箱(温度控制在45℃左右，不得超过80℃)干燥后备用，可使5ml血液不凝固。

草酸铵也可作抗凝剂，但它可使红细胞膨胀，故常常将其与草酸钾配合成合剂使用。配方为： 草酸铵6g、草酸钾4g、蒸馏水1000ml，每5ml血液用2滴即可抗凝。也可取此液0.1ml，分装于小瓶内，在45℃烘箱中烘干备用，可使5ml血液不凝固。但草酸盐抗凝血不能用于输血。

枸橼酸钠(又称柠檬酸钠)： 常用血沉测定和输血时用，不适用于血液化学检验。配成3.8%溶液，与要采血量1：10比例加入。

肝素：优点在于抗凝作用强，不影响红细胞的大小，对血液化学分析干扰少。但不宜做纤维蛋白原测定，其抗凝血涂片染色时，白细胞的着染性较差。常配成0.5%～1%溶液，2滴可使3～5ml血液不凝固。

(三)血样的处理

血液采集后，不能立即检验的，应将血片涂好并固定，需用血清的，采血时不加抗凝剂，采血后血液置于室温或37℃恒温箱中，血液凝固后，将析出的血清移至容器内冷藏或冷冻保存。需用血浆者，采抗凝血，将其及时离心(2000～3000转/分)5～10分钟，吸取血浆于密封小瓶等容器中冷冻保存。注意，进行血液电解质检测的血样，血清或血浆不应混入血细胞或溶血。血样保存最长期限，白细胞记数为2～3小时，红细胞记数为24小时，血红蛋白测定为一天，红细胞沉降率为2～3小时，血细胞压积容量测定为24小时，血小板记数为1小时。

(四)血样的送检

不能当场进行检验的样品，要装在保温瓶中，内垫好泡沫塑料或棉花。送样时尽量减少震动，以免引起破损和溶血。送检样品根据需要，分别送抗凝全血、血清或血浆。如果需要进行白细胞分类记数或血孢子虫检查，还应附送固定好的血液涂片。

(五)血常规检查

1.红细胞沉降速度的测定

红细胞沉降速度简称为血沉，是指抗凝血加入特制的血沉管中，在一定时间内观察红细胞下沉的mm数。测定血沉的方法很多，有魏氏法、涅氏法、温氏法、潘氏法、倾斜法、微量法等，常用的为魏氏法，健康犬为30分钟为1，60分钟为2。

临床意义：检查血沉可以发现贫血和脱水性疾病，发现体内潜在的病理过程。在疾病过程中，定期检查血沉的变化，可了解疾病的进程。血沉可以提示体内是否存在疾病过程，但不能单独用于临床诊断。

血沉加快，见于贫血、溶血性疾病、急性炎症、恶性肿瘤、风湿、结核、急性肾炎、急性传染病等; 血沉减慢，见于大量脱水(腹泻、呕吐、肠阻塞、大出汗、多尿等)、肝脏疾病及心力衰竭等。

2.红细胞压积容量的测定

红细胞压积容量(packed cell volume，PCV)又称压积或比容，即将抗凝血装入100刻度的玻璃管中，经离心一定时间后，红细胞下沉并压紧后所占的百分比。健康犬的PCV为45.5%(37%～55%)。

方法： 用长针头抽取抗凝血，注入温氏管底部，由下至上挤入血液到刻度10处，3000转/分离心30～40分钟，当沉淀的红细胞稳定时，读取红细胞柱的刻度数，即为红细胞压积容量数，常以百分率表示。为提高准确性，一般应在离心10分钟后再读结果，如与第一次读数相同，即可报告。

临床意义：红细胞压积容量增高见于各种原因引起的脱水，造成血液粘稠、红细胞相对增加的结果。如急性胃肠炎、液胀性胃扩张、肠阻塞、胃肠破裂、渗出性腹膜炎等; 通常可从PCV增高的程度估计患病宠物的脱水程度并粗略地估计输液量的多少。红细胞压积容量降低，见于各种原因引起的贫血。血浆颜色改变，有助于判断某些疾病。如颜色深黄，为血浆中直接胆红素或间接胆红素增加，见于肝脏疾病、胆道阻塞、溶血性疾病等;颜色呈淡红或暗红色，为溶血性疾病的特征。

3.血红蛋白含量测定

测定血红蛋白的方法很多，有比色法、比重法、血氧法、测铁法等，常用的是萨利氏目视比色法。

4.红细胞计数

诊断贫血和对贫血进行形态学分类。常用的方法为显微镜计数法。

相对性红细胞增多： 指血浆量减少，血液浓缩引起的。常见于下痢、呕吐、饮水不足等。

绝对性红细胞增多：是红细胞增生所致，见于充血性心力衰竭、慢性肺泡气肿、肺肿瘤等。

红细胞数和血红蛋白量减少，见于各种类型贫血。

红细胞形态异常：红细胞大小不均，中央区苍白，大的红细胞增多，见于营养不良性贫血。中央淡染区扩大，小的红细胞特别多，见于缺铁性贫血。红细胞呈梨形、星状，见于重症贫血。呈串线状，见于炎症和肿瘤性疾病。体积变小、着色暗，缺乏中央凹陷，见于自身免疫性和同族免疫性溶血性贫血。红细胞内含有蓝黑色大小不一的颗粒，是铅中毒的特征性表现。

5. 白细胞计数

炎症、感染、组织损伤和白血病时，常引起白细胞数量变化。因此，白细胞计数是临床上最常用的检验项目之一，计数方法有显微镜计数法和电子计数仪计数法。健康犬白细胞总数为11000(6000～18000)/mm3。

白细胞分类： 白细胞分为嗜碱性粒细胞(正常时少见)、嗜酸性粒细胞(2%～10%)、嗜中性粒细胞(66%～77%)、淋巴细胞(12%～30%)和单核细胞(3%～10%)。

嗜中性粒细胞是严重感染和炎症初期最活跃的细胞，通过吞噬作用来消灭入侵的细菌。嗜酸性粒细胞常出现在抗原一抗体反应的部位，能抑制组织胺等有毒物质的产生并有解毒作用。嗜碱性粒细胞的嗜碱性微粒具有抗凝作用。淋巴细胞与浆细胞可产生抗体，参与免疫反应。单核白细胞属于巨噬细胞，其特殊的酶系统可以对付顽强的病原体。

临床意义： 嗜中性白细胞增多见于某些急性传染病、化脓性疾病、急性疾病、慢性传染病、大手术后、外伤、酸中毒前期、烫伤等。

分析时要结合白细胞总数的增、减变化，特别要应注意核指数的变化。

核指数大于0.1，称为核左移，表示未成熟的嗜中性白细胞比例增多; 反之，小于0.1则称为核右移，系分叶型白细胞比值增多的结果。

核指数的严重左移或右移，反映病情的危重或机体的高度衰竭。

如果白细胞总数增多同时核左移，表示机体处于积极防御阶段，而白细胞总数减少时核左移，则标志着机体的抵抗力降低。

分叶核的百分比增大或核的分叶增多称为核右移，可见于重度贫血或严重的化脓性疾病。

嗜中性粒细胞减少： 见于病毒性疾病及各种疾病的垂危期，也可见于造血器官机能的抑制和衰竭。

嗜酸性粒细胞增多： 见于某些内寄生虫病、过敏性疾病、湿疹、疥癣等皮肤病。

嗜酸性粒细胞减少： 见于毒血症、尿毒症、严重创伤、中毒、饥饿及过劳等。

淋巴细胞增多：见于某些慢性传染病，急性传染病的恢复期，某些病毒性疾病及血孢子虫病等。

淋巴细胞减少： 见于内源性皮质类固醇释放增多时，如感染、肝、肾、胰和消化衰竭，消化道阻塞，休克，外科手术，肾上腺皮质机能亢进，淋巴外渗和放射线照射时。

白细胞总数增加： 一时性或症状性的称为白细胞增多症，持续性、进行性增多称为白血病。

白细胞总数减少，多数是中性粒细胞减少引起的。

中性粒细胞增多，分生理性增多、应激性增多、炎症性增多。

生理性增多，主要是由于内源性肾上腺素释放入血后，使边缘池的中性粒细胞减少，二循环池中粒细胞增多。这种生理性增多在犬不常见。

应激性增多，主要是由皮质类固醇增多引起的。皮质类固醇可加快骨髓释放速率，降低中性粒细胞的粘附力，并阻止中性粒细胞从血液中游走，致使循环池的中性粒细胞数增多。应激性增多的特点，是外周血中不出现未成熟的中性粒细胞，且伴有淋巴细胞减少。内源性皮质类固醇的释放增多，见于疼痛、麻醉、外科手术、创伤及肾上腺功能亢进时。外源性皮质类固醇增多，也可引起应激性反应，如长期应用类固醇治疗，在停止治疗后48～71小时内仍可持续呈现其效应。应激性增多在犬常见。

炎症性增多，是机体对炎症刺激的一种防御性反应。见于某些急性传染病(如炭疽、出败等)，某些化脓性疾病(化脓性腹膜炎、化脓性子宫内膜炎、肺脓肿等)、某些急性炎症(肺炎、胃肠炎等)及外伤、酸中毒的前期等。

中性粒细胞减少： 分过度使用性、生成减少性和循环池减少性等。

过度使用性减少，骨髓释放中性粒细胞速度增加，赶不上组织的过度使用，外周血液中常出现许多未成熟的中性粒细胞，见于犬瘟热、传染性肝炎等。

生成减少性减少，是由于骨髓造血机能不足所致。常见于磺胺类药物中毒、X线照射和弓形体感染等。

循环池减少性减少，是中性粒细胞一时性减少，又称为中性粒细胞假性减少症。

6.血小板计数

用尿素溶解红、白细胞而保存完整形态的血小板，直接在血细胞计数室内直接计数。健康犬为47000(20000～90000)/mm3。

血小板减少： 生成减少见于再生障碍性贫血、急性白血病、放、化疗时等;血小板破坏增多见于原发性血小板减少性紫癜、脾功能亢进等;消耗过多见于弥散性血管内凝血、血栓性血小板减少性紫癜。

血小板增多： 原发性见于原发性血小板增多症及骨髓增生综合征等;继发性见于急性感染、急性出血及急性溶血等。