(一)血糖测定
血糖测定的方法有邻甲苯胺缩合法、氧化酶法和福林一吴氏法,以邻甲苯胺缩合法为常用。其基本原理是葡萄糖在热醋酸溶液中可与邻甲苯胺缩合成蓝色的席夫氏碱,颜色深浅与葡萄糖含量成正比。测定时向被检血清和葡萄糖标准液中加邻甲苯胺显色剂显色,对比其光密度,计算出血清中葡萄糖的含量。健康宠物血清葡萄糖含量为4.0~6.4mmol/(71~115mg%)。生理性或一时性血糖升高,见于食后2~4小时内、精神紧张和强制性保定等; 病理性血糖升高,见于糖尿病、胰腺炎、酸中毒、癫痫等。血糖降低,可见于母犬低血糖症、幼犬一过性低血糖症及猎犬功能性低血糖症。
(二)血清无机磷测定
血清中无机磷含量与钙有一定关系,通常钙、磷浓度(mg%)乘积等于40,二者的乘积小于35,即可发生佝偻病或骨软病等营养性骨病。血清无机磷测定的方法有氧化亚锡法,对苯二酚法和抗坏血酸法,以氧化亚锡法为常用。其基本原理是用三氯醋酸除去蛋白,在无蛋白滤液中加入铜酸试剂,使之与无机磷结合,生成磷铜酸,再加还原剂氯化亚锡,使其还原成蓝色的铜蓝,与同样处理的磷标准液比色,求出血清无机磷的含量。
犬血清无机磷含量为0.81~1.6mmol/L(2.5~5.0mg%),食入或注射大量维生素D后,血中无机磷含量升高; 正常妊娠时,其值可降低。病理性血清无机磷升高,见于甲状旁腺机能减退、肾功能不全合并酸中毒等; 无机磷降低,见于甲状旁腺机能亢进、骨软化症、佝偻病、糖尿病及低磷血症等。
(三)血清氯化物测定
测定方法有硝酸汞滴定法、硝酸银滴定法和离子选择电极法等,以硝酸汞滴定法为常用。健康犬血清氯化物含量为90~122mmol/L。血清氯化物升高,见于急性或慢性肾小球肾炎所致的肾功能不全,或尿道、输尿管阻塞及心功能不全时,肾排泄功能降低,氯化钠摄入或注射过多及呼吸性碱中毒等。血清氯化物降低,见于剧烈呕吐、严重腹泻、急性胃肠炎、急性胃扩张、小肠变位等,丢失大量含氯的胃肠液、胰汁及胆汁等,慢性肾上腺皮质机能减退、重症糖尿病,排尿过多,丢失大量氯化物,长期应用利尿剂或大量出汗及持续性拒食等。
(四)血清钠测定
常用的测定方法有醋酸铀镁比色法、火焰光度计法、原子吸收分光光度计法和离子选择电极法等。犬血清钠含量为141~155mmol/L。血清钠增多,见于肾上腺皮质机能亢进或原发性醛固酮增多症、失水性脱水和过多输入高渗盐水及食盐中毒。血清钠减少,见于严重呕吐、腹泻或胃肠造瘘后,使胃肠道消化液丢失钠过多,慢性肾小球肾炎并发尿毒症,或糖尿病酸中毒时大量钠从尿液排出。
(五)血清钾测定
常用的测定方法有四苯硼钠比浊法、亚硝酸钴铀法、火焰光度计法、原子吸收分光光度计法和离子选择电极法等。犬血清钾含量为3.5~5.5mmol/L。血清钾增高,见于肾功能不全、肾上腺皮质机能减退、严重溶血、呼吸或循环衰竭引起的组织缺氧以及高度脱水。血清钾降低,见于长期厌食或拒食,钾盐摄入不足; 肾上腺皮质机能亢进或醛固酮增多症;某些慢性消耗性疾病和代谢性碱中毒。
(六)血清钙测定
血清钙测定的方法有乙二胺四乙酸二钠滴定法、火焰分光光度计法、高锰酸钾滴定法和离子选择电极法等。犬血清钙含量为2.5~3.0mmol/L(9.8~12.0mg%)。血清钙升高,见于甲状旁腺机能亢进,大量应用维生素D、胃肠炎、脱水及酸中毒。血清钙降低,见于甲状旁腺机能减退、维生素D缺乏、骨软病与佝偻病、产后低钙血症及慢性肾炎与尿毒症等。
(七)血清镁测定
血清镁测定常用钛黄比色法和原子吸收分光光度计法等。犬血清镁含量为0.7~1.0mmol/L(1.8~2.4mg%)。血清镁升高,见于肾功能衰竭、尿毒症、甲状腺机能减退、甲状旁腺机能减退及多发性骨髓瘤。血清镁降低,见于慢性肾炎多尿期或利尿后、甲状腺机能亢进、甲状旁腺机能亢进、肾上腺皮质机能亢进等。
(八)血浆蛋白测定
测定血浆蛋白可采用双缩脲法、凯氏定氮法和电脉法。犬血浆总蛋白含量为6.0%~7.58%,白蛋白为2.3%~4.38% ,球蛋白为2.0%~3.78%。血浆总蛋白含量增高,见于呕吐、腹泻等原因引起的脱水。总蛋白降低,见于肝功能降低,蛋白合成减少,营养不良和慢性消耗性疾病,重度烧伤、大出血、肾病等,蛋白质丢失过多。白蛋白增多,多为相对性的,见于脱水。白蛋白降低,见于传染性疾病及肝实质损伤。球蛋白增多,见于细菌和寄生虫感染所引起的机体免疫反应增强,以及自体免疫性疾病时机体的免疫机能亢进。球蛋白降低,见于低γ球蛋白血症。
(九)血浆二氧化碳结合力测定
血浆二氧化碳结合力测定方法有量积法和酚红法。犬血浆二氧化碳结合力为16~20mmol/L。血浆二氧化碳结合力增高,见于肺通气和换气障碍导致的呼吸性中毒; 呕吐、胃扩张、小肠变位等原因引起的代谢性碱中毒。血浆二氧碳结合力降低,常见于代谢性酸中毒,如酮酸中毒性糖尿病、腹泻、肾功能不全等; 呼吸性碱中毒,如脑炎、哮喘等原因使呼吸加深加快,肺换气过度。
(十)血清酶学检验
小动物临床检验常测定的血清酶有:转氨酶、肌酸磷酸激酶、乳酸脱氢酶同工酶等。
1.肌酸磷酸激酶(CPK)测定
常用肌酸显色法,犬正常值为8~60u: 对心肌、骨骼肌损伤及肌营养不良的诊断有特异性。
2.谷草转氨酶(GOT)测定
GOT又称为天门冬氨酸转氨酶; 测定方法常用金氏比色法和赖氏比色法。犬血清GOT为0~40u。血清GOT活性升高,见于急性肝炎、肝硬变、心肌炎及骨骼肌损伤。
3.谷丙转氨酶(GPT)测定
GPT又称为丙氨酸转氨酶(ALT),测定方法常用金氏比色法和赖氏比色法。犬血清GPT活性为4~66u/ml。犬许多组织、器官中含有GPT,其中以肝脏含量最高。血清GPT活性升高或降低的诊断意义与血清GOT相同。
4.血清乳酸脱氢酶(LDH)同工酶测定
常用的测定方法为醋酸纤维薄膜电泳法和琼脂糖电泳法。犬血清LDH总活性为45~233u,LDH1为1.7%~30.2%,LDH为1.2%~11.7%,LDHI为10.9%~25.0%,LDH4为11.9%~15.4%和Lm3G为30.3%~22.8%。LDH存在于肝脏、心肌、骨骼肌、肾脏等组织、器官。心肌损伤时,LDH活性明显升高; LDH5活性升高,则见于骨骼肌和肝脏疾病。
(十一)肝脏功能检查
肝脏功能按其代谢功能可分为胆色素代谢检查,如黄疸指数测定、血清胆红素定性和定量检查、尿胆色素检查等;糖代谢检查,如血糖测定和糖耐量试验等;蛋白质检查,如血浆总蛋白、白蛋白、球蛋白定量、白蛋白与球蛋白比和血清胶体稳定性试验等;脂肪代谢检查,如脂蛋白、胆固醇、甘油三酯测定等;血清酶活性测定,如谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)等。
(十二)肾功能试验
按检查的目的分为肾小球滤过机能试验、肾小管机能试验和肾血流量测定。常用的检查方法有血浆尿素氮测定、尿浓缩试验、加压素浓缩试验及酚红排泄或清除试验。
1.血浆尿素氮测定
常用方法为尿酶法。犬血浆尿素氮含量为8~10.0mmol/L(5~58mg%)。血浆尿素氮含量增加,见于肾功能衰竭、脱水、循环衰竭、尿路结石等肾前性或肾后性因素。
2.尿浓缩试验
在限制饮水的条件下,通过观察尿液比重的变化,判定肾小管的重吸收机能。受试宠物断水12~24小时,于第12小时排出膀胱内尿液,测定比重,尿比重大于1.025,表明肾脏浓缩尿液机能正常,可中止试验。比重小于1.025的,则继续断水12小时,若比重仍低于1.025,指示有2/3的肾单位丧失浓缩尿液的能力。
3.酚红排泄或清除试验
宠物静脉注射0.5%酚红1ml(5mg),测定注射后尿液中酚红排泄的百分率,或多次测定注射后血浆中酚红的浓度,计算清除半衰期(T1/2)。在排除肾外性因素影响的酚红排泄或清除率降低,表明肾脏功能不全。此外,休克、脱水、心血管疾病时,酚红排泄亦减少。