第三节 鸡传染性法氏囊病

鸡传染性法氏囊病又称甘布罗病，是由传染性法氏囊病病毒引起幼鸡的一种急性、热性、高度接触性传染病。主要症状为发病突然，传播迅速，发病率高，病程短，剧烈腹泻，极度虚弱。特征性的病变是法氏囊水肿、出血、肿大或明显萎缩，肾脏肿大并有尿酸盐沉积，腿肌、胸肌出血，腺胃和肌胃交界处条状出血。幼鸡感染后，可导致免疫抑制，并可诱发多种疫病或使多种疫苗免疫失败，是目前危害养鸡业的最严重的传染病之一，OIE将本病列为B类动物疫病，我国把其列为二类动物疫病。

本病最早于1957年发生于美国特拉华州的甘布罗 (Gumboro)，所以又称为甘布罗病(Cumboro disease)，1962年Cosgrove首次对该病进行了描述，目前在世界养鸡的国家和地区广泛流行。我国于1979年先后在北京、广州等地发现本病并分离到病毒，之后逐渐蔓延至全国各地，是近年来严重威胁我国养鸡业的重要传染病之一。一方面死亡率、淘汰率增加，另一方面导致免疫抑制，使多种有效疫苗对鸡的免疫应答下降，造成免疫失败，使鸡对病原易感性增加，造成巨大的经济损失。

【病原学】 传染性法氏囊病病毒 (Infectious bursal disease virus，IBDV) 又名传染性囊病病毒，属于双RNA病毒科 (Birnaviridae)，禽双RNA病毒属 (Avibirnavirus)。IBDV是禽双RNA病毒属的唯一成员。它的基因组由两个片段的双股RNA构成，故命名为双股双节RNA病毒。病毒是单层衣壳，无囊膜，病毒粒子呈球形，直径50～60 nm，20面立体对称，基因组含A、B两个线状双股RNA分子。病毒无红细胞凝集特性。

IBDV由5种结构蛋白组成，分别为VP1、VP2、VP3、VP4、VP5。VP2能诱导产生具有保护性的中和抗体，VP2与VP3是IBDV的主要蛋白，可共同诱导具有中和病毒活性的抗体产生。抗VP2单克隆抗体可鉴别病毒的2个血清型，而抗VP3单克隆抗体能确定2个血清型共有的群特异性抗原。目前已知IBDV有2个血清型，即血清Ⅰ型 (鸡源性毒株) 和血清Ⅱ型 (火鸡源性毒株)。二者有较低的交叉保护，仅Ⅰ型对鸡有致病性，火鸡和鸭为亚临诊感染。采取交叉中和试验，血清Ⅰ型毒株中可分为6个亚型 (包括变异株)，这些亚型毒株在抗原性上存在明显的差别，用交叉中和试验测知亚型间的相关性为10%～70%，这种毒株之间抗原性差异可能是免疫失败的原因之一。Snyder等用单抗反应证明，IBDVⅠ型病毒在田间已发生一种主抗原漂移。毒株的毒力有变强的趋势，1990年初，在美、欧及东南亚从用经典疫苗株免疫的鸡群中分离到Ⅰ型的高毒力变异株，被称为超强毒株 (Very virulent strain)，病死率超过50%。

本病毒能在鸡胚上生长繁殖，经尿囊腔接种所繁殖的病毒滴度比毛尿囊膜(CAM) 接种低，而卵黄囊接种者介于二者之间。因比分离病毒的最佳接种途径是CAM。病毒经CAM接种后3～5天死亡，胚胎全身水肿，头部和趾部充血和小点出血，肝有斑驳状坏死。由变异株引起的病变仅见肝坏死和脾肿大，不致死鸡胚。

在鸡胚中适应的IBDV毒株也能适应细胞培养，其中包括鸡胚成纤维细胞 (CEF)、鸡胚肾细胞 (CKC)、鸡淋巴细胞 (LSCC—BK3)、鸭胚细胞、鸡胚法氏囊细胞 (CEB) 和一些禽源及哺乳动物源传代细胞系。病毒能适应鸡源细胞培养，经2～3代后，可产生细胞病变，并能形成蚀斑。初次分离病毒不能适应鸡胚肾细胞培养，但在法氏囊细胞传4代后，可适应鸡胚肾细胞，连续传2代后，可产生细胞病变和形成蚀斑，有些毒株不易在CEF上生长。LSCC—BK3可用于有些毒株的初次分离，从而省去了对鸡胚的适应过程，简化了试验操作。

病毒在外界环境中极为稳定，在鸡舍内可存活4个月以上，在饲料中可存活7周左右。根据报道，病鸡舍将病鸡清除后54～122天，再放入易感鸡仍可被感染发病。病毒特别耐热，56℃3h病毒效价不受影响，60℃90min病毒不被灭活。对乙醚、氯仿不敏感，耐酸不耐碱，对甲醛、过氧化氢、复合碘胺类消毒药敏感，70℃30min也可灭活病毒。

【流行病学】

1.易感动物 自然感染仅发生于鸡，各种品种的鸡都能感染，但土种散养鸡发生较少。主要发生于2～15周龄的鸡，3～6周龄的鸡最易感，且在同一鸡群中可反复发生; 1～14日龄的鸡通常可得到母源抗体的保护，易感性较小。成年鸡因法氏囊已退化，一般呈隐性经过，但近年有138日龄的鸡也发生本病的报道。人工感染3～6周龄火鸡仅表现亚临诊症状，法氏囊病变仅见有组织学变化。国内有鸭和鹌鹑等自然感染发病的报道，并有人从麻雀中分离到病毒。

2.传染源 病鸡和带毒鸡是主要传染源，其粪便中含有大量的病毒，它们可通过粪便持续排毒1～2周。病毒可持续存在于鸡舍中。

3.传播途径 感染途径包括消化道、呼吸道和眼结膜等，带毒鸡胚可垂直传播。本病可直接接触传播，也可经病毒污染的饲料、饮水、垫料、用具、空气、人员等间接传播。小粉甲虫蚴是本病传播媒介。

4.流行形式及因素 本病往往突然发生，传播迅速，当鸡舍发现有被感染鸡时，在短时间内该鸡舍所有鸡都可被感染，通常在感染后第3天开始死亡，5～7天达到高峰，以后很快停息，表现为高峰死亡和迅速康复的曲线。病死率差异很大，有的仅为3%～5%，严重发病群病死率可达60%以上，一般为15%～20%。据不少国家报道，发现有IBD超强毒毒株存在，病死率可高达70%。由于本病易造成免疫抑制，使鸡群对大肠杆菌病、新城疫、鸡支原体等病易感性增加，常出现混合感染，导致病死率提高; 饲养管理不当、卫生条件差、消毒不严格等因素的存在可加重本病的流行。

本病无明显的季节性和周期性，只要有易感鸡存在并暴露于污染的环境中，任何时候均可发生。

【临诊症状】 本病潜伏期为2～3天。根据临诊表现可分为典型感染和非典型 (或叫亚临床型) 感染。

典型感染多见于新疫区和高度易感的鸡群，常呈急性暴发，有典型的临诊表现和固定的病程。最初常见个别鸡突然发病，1天左右波及全群。病鸡精神委顿，羽毛蓬松，采食减少，畏寒，常扎堆在一起，随即出现腹泻，排出白色黏稠和水样稀粪，泄殖腔周围的羽毛被粪便污染。严重者病鸡头垂地，闭眼呈昏睡状态，对外界刺激反应迟钝或消失。后期体温低于正常，严重脱水，极度虚弱，最后死亡，病程1～3天。整个鸡群的死亡高峰在发病后3～5天，以后2～3天逐渐平息，病死率一般在30%左右，严重者可达60%以上。部分病鸡的病程可拖延2～3周，但耐过鸡往往发育不良，消瘦，贫血，生长缓慢。

非典型 (或叫亚临床型) 感染主要见于老疫区或具有一定免疫力的鸡群，或是感染低毒力毒株的鸡群。表现感染率高，发病率低，症状不典型，法氏囊萎缩，病死率较低，但由于产生免疫抑制严重，而危害性更大。

【病理变化】 IBD的病死鸡表现脱水，胸部、腿部肌肉出血 (见彩图69、彩图70)。法氏囊的病变具有特征性，可见法氏囊内黏液增多，法氏囊水肿和出血，体积增大，重量增加，比正常值重2倍以上 (见彩图71)，有些呈胶冻样水肿 (见彩图72)，5天后法氏囊开始萎缩，切开后黏膜皱褶多混浊不清，黏膜表面有点状出血或弥漫出血; 严重者法氏囊出血肿大呈紫葡萄状 (见彩图70、彩图73)，内有干酪样渗出物。肾脏有不同程度的肿胀。腺胃和肌胃交界处见有条状出血点。泄殖腔内积有大量灰白色稀粪，内含石灰渣样物质。盲肠扁桃体出血、肿胀，有时可见肝、脾、肺等器官出血。

非典型 (或叫亚临床型) 感染的病例常见法氏囊萎缩，皱襞扁平，囊腔内有干酪样物质。

组织学变化，可见法氏囊髓质区的淋巴细胞坏死和变性，使正常的滤泡结构发生改变。淋巴细胞被异染细胞、细胞残屑的团块和增生的网状内皮细胞所取代。滤泡的髓质区形成囊状空腔，出现异嗜细胞和浆细胞的坏死和吞噬现象。法氏囊上皮层增生，形成一种柱状上皮细胞组成的腺体状结构，在这些细胞内有黏蛋白小体。脾生发滤泡和小动脉周围的淋巴细胞鞘发生淋巴细胞性坏死。肾组织可见异染细胞浸润。肝血管周围可见到轻度的单核细胞浸润。

【诊断】 根据本病的流行病学、症状、病变的特征，如突然发病，传播迅速，发病率高，有明显的高峰死亡曲线和迅速康复的特点; 法氏囊水肿和出血，体积增大，黏膜皱褶多混浊不清，严重者法氏囊内有干酪样分泌物等，就可做出诊断。由IBDV变异株感染的鸡，只有通过法氏囊的病理组织学观察和实验室检验才能做出诊断。病毒分离鉴定、血清学试验和易感鸡接种是确诊本病的主要方法。按照《传染性囊病诊断技术》(GB/T19167—2003)进行诊断。

在国际贸易中，无指定诊断方法，替代诊断方法为琼脂凝胶免疫扩散试验和酶联免疫吸附试验。

病料样品采集： 采集发病鸡的法氏囊、脾、肾和血液。

1.病毒分离鉴定 自然感染IBD的鸡群，在发病后的2～3天，法氏囊中的病毒含量最高，其次是脾和肾。取发病典型的法氏囊和脾，经磨碎后，加灭菌生理盐水作1：5～1：10悬液，以3 000 r/min离心10 min，取上清液加入抗生素作用1h，经绒毛尿囊膜接种9～12日龄SPF鸡胚。受感染的鸡胚在3～5天死亡，可见到胚胎水肿、出血。鉴定分离出来的IBDV，可用已知阳性血清与鸡胚或鸡胚成纤维细胞培养物作中和试验; 血清亚型的鉴定则需进行复杂的交叉中和试验。

IBD变异毒株能诱发胚胎的肝坏死，脾肿大，不引起鸡胚死亡，可采用交叉中和试验加以区别。在变异株不断出现时，应尽快做出确诊，以核酸探针和单抗的免疫酶捕捉抗原 (AC—ELISA) 的方法，有助于从临诊样本中直接检测IBDV，做出快速诊断。用RT—PCR方法对扩增的基因片段作酶切分析，可区分血清Ⅰ型的经典株和变异株。

2.琼脂扩散试验 (AGP) 本方法也常用于IBD诊断。可应用此法进行流行病学调查和检测疫苗免疫后的IBDV抗体，本方法不能区分血清型差异，主要查出群特异性抗原。

3.易感鸡感染试验 取病死鸡病变典型的法氏囊，经磨碎制成悬液，经滴鼻和口服感染21～25日龄易感鸡，在感染后48～72 h出现症状，死后剖检见法氏囊有特征性的病变。

4.反转录—聚合酶链反应 (RT—PCR) 是近年来对IBD做实验室病原学诊断的最常用方法，灵敏、特异、快速，易于标准化、自动化，目前已普遍使用。

5.其他实验室检验方法 荧光抗体技术、中和试验、电镜技术、免疫组化、对流免疫电泳、协同凝集试验等均可用于本病的诊断。

6.鉴别诊断 IBD病鸡通常有急性肾炎，因此应注意与鸡传染性支气管炎肾病变型相鉴别。患肾病型鸡可见肾肿大，有时输尿管扩大沉积尿酸盐，法氏囊充血和轻度出血，但法氏囊无水肿，耐过鸡法氏囊不见萎缩。腺胃和肌胃交界处无出血。

【防控措施】 鸡感染IBDV或用疫苗免疫后，都能刺激机体产生免疫应答，体液免疫是该病保护性免疫应答的主要机制。目前发现应用血清Ⅰ型的疫苗毒株，对雏鸡免疫后所产生的免疫应答不能抵抗亚型或变异毒株的感染。国内也有报道以5种常用的血清Ⅰ型疫苗对雏鸡进行免疫，并应用当地分离的6株亚型毒株分别攻毒，结果最高保护率为78%; 最低仅51%。

患IBD的病愈鸡或人工高免血清、卵黄内具有保护性的被动免疫抗体，在雏鸡2周龄左右能抵抗IBD野毒的感染，因此应用高免血清和卵黄抗体，对刚发病的雏鸡注射有较好治疗效果。此方法可能人为传播多种传染病，除非不得已，不应作为IBD的控制方法来提倡。

目前，国内有生物药业公司生产的 “鸡传染性法氏囊病精制蛋黄抗体”，可用于本病早、中期感染的治疗和紧急预防，具有很好的效果。该产品主要含鸡传染性法氏囊病蛋黄抗体，AGP效价≥1：32，皮下或肌肉注射均可，治疗用量35日龄以下，1.5～2.0 ml; 35日龄以上，2.0～2.5 ml。紧急预防剂量35日龄以下，0.5～1 ml; 35日龄以上，1～1.5 ml; 必要时可以重复注射2～3次，注射后的被动免疫保护期为5～7天。因其是精制蛋黄抗体，可避免蛋源性疫病的传播。

IBD的预防和控制，需要采取综合防控措施：

1.严格兽医卫生措施 在防控本病时，首先要注意对环境的消毒，特别是育雏室。将有效消毒药对环境、鸡舍、用具、笼具进行喷洒，经4～6 h后，进行彻底清扫和冲洗，然后再经2～3次消毒。因为雏鸡在疫苗接种到抗体产生需经一段时间，所以必须将免疫接种的雏鸡，放置在彻底消毒的育雏室内，以预防IBDV的早期感染。如果被IBDV污染后的环境，不采取严格、认真、彻底消毒措施，在污染环境中饲养的雏鸡，由于大量IBDV先于疫苗侵害法氏囊，再有效的疫苗也不能获得有效的免疫力。

2.提高种鸡的母源抗体水平 种鸡群经疫苗免疫后，可产生高的抗体水平，可将其母源抗体传播给子代。如果种鸡在18～20周龄和40～42周龄经2次接种IBD油佐剂灭活苗后，雏鸡可获得较整齐和较高的母源抗体，在2～3周龄内得到较好的保护，能防止雏鸡早期感染和免疫抑制。

3.雏鸡的免疫接种 雏鸡的母源抗体只能维持一定的时间。确定弱毒疫苗首次免疫日龄是很重要的，首次接种应于母源抗体降至较低水平时进行。因为母源抗体高会影响疫苗免疫效果，过迟接种疫苗会使IBDV母源抗体低的或无抗体的雏鸡感染，而失去免疫接种的意义。所以确定首免日龄可应用琼扩试验测定雏鸡母源抗体消长情况，当1日龄雏鸡测定，阳性率不到80%的鸡群在10～16日龄间首免; 阳性率达80%～100%的鸡群，在7～10日龄再检测一次抗体，阳性率在50%时，可确定于14～18日龄首免。目前我国常用的疫苗有两大类 (活毒疫苗和灭活疫苗)，活毒疫苗有三种类型： 一是弱毒，对法氏囊没有任何损害，免疫后抗体产生迟，效价较低，在自然界遇到较强的IBDV时，使用这类疫苗的鸡保护率较低，PBG98、LKT、Bu-2、LZD258等属于这种类型疫苗; 二是中等毒力，接种后对法氏囊有轻度损伤，这种反应在10天后消失，对血清Ⅰ型的强毒的保护率高，Cu-M、D78、TAD、B87、BJ836属于这类疫苗，在污染场使用这类疫苗效果较好; 三是中等偏强毒力型，在2周龄前使用均对法氏囊造成严重损害，引起免疫抑制，但并不影响对IBD本身的保护力，因此不为用户注意。使用这类疫苗的鸡舍，疫苗毒可长期存活，感染下一批幼龄雏鸡，则可造成严重免疫抑制，对ND免疫失败是重要标志。

4. 由于IBDV变异株的出现，使得近年来IBD的免疫失败增多，接种血清Ⅰ型的IBD疫苗对变异株的感染得不到很好的保护作用。国外报道用变异株病毒制成灭活苗或弱毒疫苗，不仅可以预防IBD，而且对血清Ⅰ型IBDV也能产生保护性免疫应答，可显著减少IBD的发病率和病死率。

发现疫情，应按《动物防疫法》的规定，采取严格控制、扑灭措施，防止扩散蔓延。