家兔人工授精技术在生产实践中已广泛应用。其优点在于能充分利用优良种公兔，提高兔群质量，迅速推广良种，同时也减少了种公兔的饲养量，降低饲养成本，便于集约化生产管理。其技术环节包括采精、精液检查、精液稀释和输精等步骤。

1.采精

采精包括安装准备好采精器设备及相关试剂。

(1)采精器的结构。采精器又叫假阴道，其构造见图5.5，由外壳、内胎和集精袋三部分组成。外壳直径30毫米左右，长度80～100毫米，用镀锌板或硬塑料制成，上有注水孔或调节压力的旋钮。外壳内装与之内径相配的软海绵一块，将海绵沿直轴方向打一小孔，孔径为15毫米，孔口呈伞形。

图5.5　采精器构造(单位：毫米)

(2)采精前器械的准备。除了采精器外，开展家兔人工授精还需要购置显微镜、保温瓶、消毒锅以及载玻片、盖玻片、量筒、烧杯、温度计、移液管、试管等实验室常用器械，还需要配制稀释液、冲洗液和消毒液等。冲洗液为5.51%的葡萄糖溶液，消毒液为70%的酒精及棉球，稀释液用蒸馏水、中性盐、糖类、奶类、卵黄、蜂蜜、抗生素等配成。

采精器安装时，首先用冲洗液将各部件洗净，认真检查有无破损，然后用消毒液消毒集精袋，将集精袋装入采精器内胎中，开口的一端翻转，固定在外壳边缘，有囊的一端露出内胎的另一端约1厘米。安装完成后，用冲洗液再次冲洗，从外壳注水孔注入50～60 ℃的温水，用海绵将温水吸收。用温度计蘸取少量消过毒的白凡士林油或液状石蜡在采精器内部擦涂，并测量采精器内4厘米处的温度，当温度降至43 ℃左右时即可采精。

(3)采精操作。采精的地点可选在公兔笼内进行。左手保定母兔(台兔)诱情，待公兔爬跨时，右手持采精器呈43°左右角度放在母兔后腿中间。待公兔前挺射精后，立即将采精器孔口朝上，防止精液流失。待精液全部流入集精袋后，取出集精袋，对精液进行检查、稀释。

公兔一般每天采精一次比较合适，采精过频会影响品质。公兔阴茎对采精器内部的温度极为敏感，低于40 ℃时不易引起射精，过高温度则会对种公兔养成嗜高温射精的不良习惯，温度过高对精液品质也有影响。因此，采精器内温度略高于母兔体温即可，以40～42 ℃为宜。

2.精液检查

进行家兔精液品质检查应在18～25 ℃的室温环境中为宜，并在采精后立即进行。外观检查主要观察射精量、色泽、pH值，显微镜检查主要检测精子的活力、密度和畸形率。

(1)外观检查。公兔射精量与品种、体型、饲养管理和采精技术有关，一般为0.5～1.5毫升。正常的精液为淡乳白色或灰白色，混浊而不透明，pH值接近7，具有特殊的腥味。混入尿液的精液颜色发黄并带有臭味;公兔生殖器有炎症出血时，精液带红色;精子过少或无精子的精液呈清水样。精液的pH值一般为6.8～7.3，公兔生殖器官有疾病时精液pH值会偏高，精子代谢和呼吸增强，耗能增多，不易保存并影响受精能力。

(2)显微检查。精液中精子的密度、活力、畸形率等品质检查需用显微镜。测定时，把显微镜置于局部温度为37～40 ℃的恒温台或者保温箱内进行。用乳头吸管吸取少许精液，滴于载玻片上，轻轻压上盖玻片，放在200～400倍显微镜下观察。

精子的密度一般采用估测法。依据显微镜目镜视野中精子间隙大小评定为“密、中、稀”三个等级。视野下精子之间无间隙为“密”，精子之间能容纳1～2个精子为“中”，精子之间间隙能容纳2个以上精子为“稀”(图5.6)。用于输精的精子密度必须在“中”级以上。

图5.6　精子密度估测法

1.密　2.中　3.稀

精子的活力采用“十级制”计分法。凡视野下100%精子呈直线运动者活力为1.0级，90%精子呈直线前进运动的活力为0.9，80%的为0.8，以此类推。公兔的鲜精活力一般为0.7～0.8。为了保证受胎率，用以输精的常温精液的精子活力应在0.6以上，冷冻精液解冻后精子活力要在0.3以上。

精子畸形率是指畸形精子占总精子数的百分比。畸形精子主要有双头、双尾、大头、小尾、无头、无尾、尾部蜷曲等。其检测方法为：做一精液抹片，自然干燥后，用红(蓝)墨水或0.5%甲紫酒精溶液或5%伊红水溶液染色3～5分钟，再用清水轻轻冲洗并晾干，置于400～600倍显微镜下，随机数出不同视野500个精子中畸形精子数。畸形率在20%以下的精液方可用于稀释授精。

3.精液稀释

精液稀释的目的是扩大精液总量，增加输精母兔只数，同时也是为了延长精子存活时间。

(1)稀释液。主要有以下几类成分：

1)营养成分：常用果糖、山梨醇、甘油磷酸胆碱(GPC)和磷脂给精子提供营养。

2)缓冲物质：常用柠檬酸钠、酒石酸钾钠、磷酸二氢钾和磷酸氢二钠等，保持精液适当的pH值。

3)防冷击保护剂：常用的有卵磷脂、卵黄、蛋白胨等，提供营养并防止冷冻中死亡。

4)制菌物质：常用青霉素、链霉素，防止微生物污染。

表5.2中列出了家兔精液稀释液几个配方实例，可参考使用。

(2)稀释方法。稀释操作时，把35 ℃左右的稀释液沿集精管壁，缓慢地倾注到精液中，注入后用玻璃棒轻轻搅动，使其均匀混合，避免用力摇动或振荡;稀释液的温度要与精液等温，保持在25～30 ℃。现稀释现用的精液保存在30 ℃左右的环境中即可;若存放4～8小时，可保存在15～20 ℃的室温中;需长时间保存时，要先缓慢降低温度，再放入冰箱或其他代用物保持在0～5 ℃的环境中。

通常情况下，精液以稀释5～9倍为宜(精子密度高者也可稀释20倍)，保持每毫升稀释后的精液内有1 000万个活力旺盛的精子。稀释后的精液应做一次显微镜检查，发现精子活力不强或死亡过多则不能用作输精。

表5.2　家兔精液稀释液配方实例