通过药敏试验可以判定细菌对抗菌药物的敏感性，以便选择最有效的药物进行治疗。常用的药敏试验有纸片法、试管法、挖洞法等。

(一)纸片法

纸片法是将含有药物的纸片置于已接种待测菌的固体培养基上，抗菌药物通过向培养基内的扩散，抑制敏感菌的生长，从而出现抑菌环。由于药物扩散的距离越远，达到该距离的药物浓度越低，故可根据抑菌环的大小，判断细菌对药物的敏感度。该法操作简便，容易掌握，但只用于定性试验。

1.试验材料：普通琼脂培养基或特殊培养基、各类药敏纸片、从待检病料中分离出的被试细菌菌株。

2.试验方法：

(1)用灭菌接种环挑取待试细菌的纯培养物，以划线接种方式将挑取的细菌涂布到普通琼脂平板上或其他特殊培养基平板上(愈密愈好，且浓度要均匀);或者挑取待试细菌于少量灭菌生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子蘸取菌液涂布到培养基平板上，尽可能涂布得致密而均匀。

(2)用尖头镊子夹取已制备好的各种药敏纸片分别贴到上述已接种好细菌的培养基表面。为了使药敏试片与培养基表面密贴，可用镊子轻轻按压纸片。纸片在培养基上的分布，一般可为中央贴一种纸片，外周以等距离贴若干种纸片。一个直径90毫米的平皿可贴5～6个药敏纸片。每一个药敏纸片上应有标记，或每贴一种纸片后，在平皿底背面标记上其药物种类。

(3)将贴好药敏纸片的平皿底部朝下，置37 ℃温箱中培养24小时，取出观察结果。

3.观察结果与判定标准：

(1)经培养后，凡对被试细菌有抑制作用的药物，在其纸片周围出现一个无菌生长区，称为抑菌圈(环)。可用直尺测量抑菌圈的大小，抑菌圈越大，说明该药物对被试菌的抑制杀灭作用越强;反之越弱。若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有较强的耐药性。

(2)判定结果时，应按抑菌圈直径大小作为判定敏感度高低的标准。一般常用药物对细菌的敏感试验判定标准见表7.1。

表7.1　药敏试验判定标准