细胞学检查是诊断许多临床病例（包括手术病例）的重要手段，具有操作简便、不需特殊仪器设备、所需时间较短、经济、对动物机体损伤较小等优点。因此在小动物临床上发展迅速，应用也来越广泛。

肿瘤疾病在小动物临床中较常见，尤其在老龄动物中。肿瘤的细胞学检查可帮助兽医做出合理的治疗方案。

影响细胞学诊断的最重要的因素之一为样品的质量。因此，准确的细胞学检查结果不仅需要有经验的读片者，还需要恰当的采样、涂片以及染色技术。

1．采样——细针穿刺检查

细针穿刺是样品采集中最常用的方法，与刮片法、涂片法等相比，它可避免病灶表面的污染，能获取深部样品。细针穿刺检查可用普通注射器和针头来完成，有负压抽吸和无负压穿刺两种方法。常用22-25 G针头和2-10 ml注射器，采样部位剃毛消毒。

1.1 负压抽吸法（图1）

（1）一手固定肿物，另一手持注射器，向肿物中部刺入。

（2）向后抽吸注射器活塞，可到注射器容量的四分之三，稍退针头向不同方向再次进针，并重复几次，此时注意针头不要出肿物表面。

（3）最后释放负压，退针。

（4）拔出针头，向注射器内吸入空气，重新连接针头，推动活塞将针头内物质喷在载玻片上。

1.2 无负压穿刺法（图2）

一手固定肿物，另一手持针头，向肿物中部刺入。换不同方向重复几次，最后退针，针头接入有空气的注射器上，向载玻片上吹打针头内物质。此方法可用于淋巴结的穿刺，因为淋巴细胞较易脱落。

穿刺时要避免血液的污染，另外为了提高诊断质量，一般要制作4-6个涂片。

2．制片——十字交叉法

这是细针穿刺采样制片的最好的方法，目的在于所制造出的涂片中细胞分散良好、单层且未破碎。细针穿刺中所采集的样品吹打在干净载玻片的磨砂端；另一载玻片垂直放在样品上方，轻轻挤压样品使其在两个载玻片之间散；上方载玻片向远离磨砂端方向滑动，使样品伸展成羽毛样（图3）。注意样品不要过多，以防涂片过厚。

3. 染色

小动物临床上常用的染色方法为Romanowsky type 染色（包括瑞士染色、吉姆萨染色、Diff Quick等）。Romanowsky type染色价钱便宜、容易获取、操作简便，且能很好的显示出细胞质和细胞核的情况。

4. 读片

一般认为，在涂片中可见单一形态的细胞群而未见明显炎症反应时可诊断为肿瘤。根据细胞形态特征可进一步分为良性或恶性肿瘤。良性肿瘤细胞大小、细胞核大小、核质比一致。当细胞核表现出三个或三个以上恶性标志（表1）时认为恶性肿瘤。

通过穿刺而得的肿瘤细胞根据其形态可分为3种类型，包括上皮细胞瘤，间质细胞瘤和圆细胞瘤。

4.1 上皮细胞瘤

上皮细胞瘤一般起源于腺体（如乳腺、皮脂腺、前列腺等）、实质器官（如肾小管上皮、胆道上皮等）或衬托组织（如血管内皮、腹膜）。此肿瘤细胞常成片或成簇脱落；细胞之间联系紧密，有时可见细胞之间的链接；胞体较大、细胞呈圆形或多边形、细胞质边界清楚；细胞核圆形至椭圆形。肛周瘤、鳞状细胞癌、腺癌、基底细胞瘤等均属于此类。

4.2 间质细胞瘤

间质细胞起源于结缔组织，在正常情况下细胞穿刺时间质细胞不脱落。在良性间质细胞瘤时细胞脱落的数量也较少，使诊断困难。而在恶性肿瘤时，脱落细胞较多。细胞常单个存在，呈梭形或椭圆形。此类细胞往往比上皮细胞小，核圆至椭圆形。与其他两类细胞不同，此类细胞的胞质边界不清，逐渐混入背景中。此类肿瘤包括纤维（肉）瘤、骨肉瘤、血管外皮细胞瘤、血管肉瘤等。

4.3 圆细胞瘤

此类肿瘤常与造血细胞有关。在穿刺时细胞容易脱落，因此可见较多细胞。细胞单个存在、圆形，胞质边界清楚，较上皮细胞小，细胞核圆形或有压痕。圆细胞瘤包括肥大细胞瘤、淋巴（肉）瘤、浆细胞瘤、组织细胞瘤和传染性性病瘤（TVT）。

4.3.1 肥大细胞瘤（图6）

肥大细胞瘤胞浆内可见大量紫色颗粒，由于这些颗粒强啫碱性，使细胞核显得灰白。有时背景中亦可见游离的颗粒。还可见嗜酸性细胞浸润。

4.3.2 淋巴（肉）瘤（图7）

通常在犬猫淋巴肉瘤常由淋巴母细胞组成。在淋巴结穿刺时如果淋巴母细胞占大于50%的时候可诊断为淋巴肉瘤。淋巴母细胞细胞由于其高核质比和强啫碱性细胞质较易辨认。淋巴细胞（尤其淋巴母细胞）较脆弱，因此在穿刺、制片中很容易被破坏。如果涂片中大量细胞被破坏而影响诊断时需要重新采样。

4.3.3 浆细胞瘤（图8）

浆细胞瘤较少见，常发于皮肤，且大多为良性。主要特征为细胞核偏心，胞质较多，啫碱性强，在核旁边有一明显淡染区为高尔基体。

4.3.4 组织细胞瘤（图9）

此类肿瘤常发于幼年犬，为良性肿瘤，可自行消退。细胞中等大小，稍大于中性粒细胞。细胞核常圆至椭圆形，但有时不规则。细胞核染色质均质，核仁不明显。胞质较多，呈淡蓝灰色。

4.3.5 传染性性病瘤（TVT）（图10）

常见于生殖器官，但也见于其他部位（如鼻腔）。与其他圆形细胞瘤相比，此细胞形态多样；细胞质较多，呈淡蓝色；最典型特征为在细胞质中可见大量边界清楚的空泡；核大小可能不一，染色质粗糙，核仁明显，有丝分裂常见。