卡铂为顺－１，１－环丁烷二羧酸二氨基合铂（Ⅱ），它能在细胞内形成活性强的复合物，通过共价键结合在ＤＮＡ单链上或插入ＤＮＡ双链间，形成链内和链间交联，从而抑制ＤＮＡ 的复制而发挥作用［１］。

它的抗肿瘤活性谱与顺铂相似，对于骨肉瘤、黑色素瘤、鳞状上皮癌、软组织肉瘤等的辅助治疗都有一定的疗效。卡铂的毒性作用为骨髓抑制，肾毒性和较低的胃肠道毒性，但对小型犬还有潜在的较严重的胃肠道毒性。我们作了相关试验，报告如下。

１　材料与方法

１．１　动物　

６只成年小型犬，公犬３只，母犬３只，平均体重８±０．５ｋｇ。试验前进行血常规检查和血清生化检查。结果均正常。笼养，自由饮水，饲喂成犬粮。

１．２　试剂与仪器　

注射用卡铂：规格１００ｍｇ；５％葡萄糖注射液；８４６合剂；舒泰；瑞氏染色液；ＥＤＴＡ抗凝剂。全自动血细胞分析仪；全自动生化分析仪；

生物安全柜；生物组织多功能处理机；生物组织包埋机；封闭式切片机；抗凝管；一次性无菌注射器；骨髓穿刺针等。

１．３　试验方案　

将７只试验犬中的６只分为两组，每组３只犬，另１只作为空白对照。每３周静脉注射１次卡铂（第０、３、６周）。其中低剂量组卡铂剂量为３００ｍｇ／ｍ２，高剂量组的卡铂剂量为４００ｍｇ／ｍ２，首次用药前采集样本做为空白对照。每天观察犬的精神状况、食欲、粪便，每周进行１次全血细胞计数和白细胞分类计数，每次给药前进行１次血清生化检查。高剂量组进行２次骨髓穿刺，第１次在给药前，作为试验的参照，第２次在给药３次后（第９周）。第９周统一实施安乐死，取小肠、肝脏、肾脏组织，制作病理组织切片。

１．４　骨髓穿刺涂片的制作方法　

骨髓穿刺前准备０．５ｍＬ的ＥＤＴＡ抗凝剂。肌肉注射８４６和舒泰对犬进行全身麻醉，将犬置于侧卧位置，剃掉肱骨头区域的毛发。无菌消毒并用创巾覆盖，用无菌刀片做切口，穿刺针头带着套管芯从肱骨近端前侧面插入。当进入到骨髓时，可感觉到压力逐渐减小。抽出套管芯，将注射器连接到针头上，回抽活塞（到针管容积的２／３或３／４）以产生较大负压。用取得的样品推挤到斜放的玻片上。另一玻片置于此玻片上，向相反方向滑动。将玻片吹干，进行瑞氏染色［２］。

２　结果与分析

２．１　临床症状与血清生化检查　

试验中，低剂量组１只犬和高剂量组２只犬在用药后出现了不同程度的食欲减退甚至食欲废绝，可自行缓解。低、高剂量组各有１只犬出现了呕吐和便血症状，也可自愈。生化检测指标均未出现异常，且用药前后数值变动很小。通过高低剂量间的配对ｔ检验发现，两个剂量组间球蛋白（ＧＬＯ）有显著性差异，总蛋白（ＴＰ）、白蛋白（ＡＬＢ）、谷丙转氨酶（ＧＰＴ）、谷草转氨酶（ＧＯＴ）、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）、γ－谷氨酰转肽酶（ＧＧＴ）、肌酐（ＣＲＥＡ）和尿素氮（ＢＵＮ）等均无显著差异。可说明，食欲减退、呕吐和便血等临床症状与剂量无关，且有个体差异。通过血清生化检查发现，卡铂不会对犬产生肝、肾功能的损害。

２．２　全血细胞计数　

通过高低剂量间的配对ｔ检验发现，卡铂对白细胞（ＷＢＣ）、红细胞（ＲＢＣ）、血小板PLT的影响在高低剂量间都有极显著的差异（Ｐ＜０．０１）。第１次给药后，２组犬的血小板数均降低，低剂量组在第２周降到最低。第２次给药后，高、低剂量组血小板数均呈现先继续回升，再降低的变化规律。第３次给药后，低剂量组血小板数又迅速降低，且在２周后（第８周）降到最低。高剂量组血小板数总体上呈下降趋势（见表１）。

卡铂对犬的血液学毒性主要表现为嗜中性粒细胞和血小板减少，在化疗后的１１～１４ｄ降到最低点，是可逆的且为剂量依赖，高剂量组的降低幅度比低剂量组更明显。而红细胞的平均生存时间比血小板和粒细胞长，因此下降不明显［３］白细胞下降主要源于嗜中性粒细胞的下降，是发生了骨髓抑制。

卡铂引起的骨髓泛细胞性再生不良造成血小板数减少。

２．３　骨髓穿刺涂片　

用药前的骨髓涂片在低倍镜下可看到各种有核细胞（见中插彩版图１）。高倍镜下，可按骨髓内细胞所处的发育阶段将其分为红细胞系和髓细胞系［３］早幼红细胞没有核仁，胞核致密、周围有亮区，胞浆较深；中幼红细胞的染色质固缩，胞浆中由于结合了血红蛋白而变红；晚幼红细胞的胞核常偏离中心，胞浆深红。早幼粒细胞的染色浅，胞浆内含红蓝颗粒（见中插彩版图２）

低倍镜下，用药后的骨髓穿刺涂片与正常骨髓涂片变化不大，高倍镜下的各种骨髓细胞在形态学方面也未出现明显变化。

骨髓抑制在骨髓涂片中应体现为红细胞系细胞和髓细胞系细胞同时减少，出现非典型细胞，原始细胞不超过３０％。但我们的试验结果并未出现这种典型的变化。原因可能有两个：第一，卡铂对用药动物的骨髓毒性在第１次用药后最高，之后会减低。
第３次用药后进行骨髓穿刺时，可能骨髓的抑制程度已经不明显；第二，我们选择的骨髓穿刺时间为外周血细胞抑制程度最高的时候，而骨髓细胞生成的减少反应到外周血还需要一定时间。若能找到最佳穿刺时间，可看到明显骨髓抑制。

２．４　组织病理学检查　

低剂量组犬静脉注射卡铂后，肝、肾组织无明显影响，肠组织有轻微的毒性；而高剂量对犬有轻微的肝、肾毒性，一定的肠毒性（见中插彩版３～６）。

卡铂从肾脏排出时引起肾小管近端上皮细胞的线粒体损伤，使血中尿素氮增加，肌酐扩清率下降。由于用来监测肾功能的尿素氮（ＢＵＮ），主要是反映肾小球的功能，故难以早期发现肾小管的损伤。而卡铂又有较高的水溶性，易从尿液中排出，故肾毒性轻微［４－５］。卡铂可抑制肝组织的抗氧化系统，肝脏不能有效清除自由基，自由基攻击生物大分子，引起氧化损伤，但通过肝脏组织切片发现，卡铂只有轻微的肝毒性。

卡铂对增殖迅速的肠黏膜上皮有一定的毒性影响，以回盲部最重。可能与药物经肝、肠循环，反复接触此部位有关。

３　结论
通过试验可以看出，卡铂有血液毒性和胃肠毒性，以及轻微的肾毒性、肝毒性。在卡铂的治疗过程中，对可能出现的呕吐、腹泻等症状需要给予相应的助消化药、止吐止泻药和保护胃黏膜药物。若犬有厌食的表现，可尝试饲喂富含动物性脂肪的食物。
而针对其长期蓄积而产生的肾毒性，应定期通过生化来监测。临床试验证明，地美司钠（Ｄｉｓｍｅｓｎａ）这种二甲基二硫醚的衍生物与卡铂合用可减轻其骨髓抑制和呕吐等副作用［６］。

参考文献：

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［２］　Ｃｈａｒｌｅｓ　Ｍ．Ｈｅｎｄｒｉｘ，Ｍａｒｇｉ　Ｓｉｒｏｉｓ．兽医临床实验室检验手册
［Ｍ］．夏兆飞主译．北京：中国农业大学出版社，２０１０：４２－４８．
［３］　Ｒｉｃｋ　Ｌ，Ｃｏｗｅｌｌ，Ｒｏｎａｌｄ　Ｄ，Ｔｙｌｅｒ　Ｊａｍｅｓ　Ｈ，Ｍｅｉｎｋｏｔｈ，ｅｔ　ａｌ．
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［５］　李秀琴，陈西敬，任伟超，等．大鼠静脉注射３种铂制剂后铂的肾排泄与肾分布比较研究［Ｊ］．中国药房，２００８，１９（２８）：２１８７－２１８８．
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