【摘要】本研究初步调查了广州和深圳地区犬猫葡萄球菌的耐药状况，旨在为临床合理使用抗菌药、宠物源细菌耐药性检测和宠物临床抗菌药的监管提供依据。2007年12月~2009年12月分离自广州和深圳宠物医院的患病或健康犬猫的133株葡萄球菌，采用了琼脂稀释法测定了12种抗菌药物的最小抑菌浓度（MIC），并对其药物敏感性进行统计和分析。结果表明：分离的133株葡萄球菌有121株至少对一种抗菌药耐药，耐药性最严重的是四环素、青霉素和克林霉素，耐药率达70%以上；其次是氟苯尼考和环丙沙星，耐药率为59%和45%；对恩诺沙星和氯霉素耐药率稍低，为37%；敏感性较高的是万古霉素、头孢唑啉和庆大霉素，分别为1%、1%和8%。本研究表明，目前广州和深圳地区宠物源葡萄球菌对抗菌药物的耐药性比较严重，应该引起宠物临床兽医师的重视，减少滥用和无指征用药，提高公共卫生安全意识。

【关键词】耐药性 宠物源 葡萄球菌

1 前言

现代社会宠物数量日益增加，小动物临床上抗菌药的使用亦非常广泛而频繁，甚至有滥用的迹象，很容易导致耐药性的产生。而且人类与动物的接触越来越频繁、密切，其耐药基因也可能通过接触在人和动物之间传递，最近国外已有犬的多重耐药细菌传给了人的报道。鉴于此，一些发达国家对小动物临床的细菌耐药问题非常重视，已有不少宠物源细菌耐药性的研究，总结出某地区的耐药情况，并研究其对公共卫生的影响。挪威、瑞典和丹麦等国家，已将宠物纳入了耐药性监测网络。目前我国对食品动物抗菌药的使用有严格的规定，但是对于宠物医疗方面，始终很少人去关注。实际上随着国内宠物行业的蓬勃发展，抗菌药的使用量非常大，加上小动物临床从业人员良莠不齐，无指征用药、滥用和不合理使用抗菌药现象很严重，由此导致的耐药问题可能比较突出。葡萄球菌是人和伴侣动物身上的正常菌群，同时也是条件致病菌，其耐药性亦比较遍。本研究拟调查宠物源葡萄球菌对常用抗菌药物的敏感性，为小动物临床合理使用抗菌药物提供指导，并希望引起宠物临床兽医师对耐药性的重视，提高公共安全意识。

2 材料与方法

2.1样品的来源

2007年12月至2009年12月采集自广州和深圳兽医门诊中前来就的患病犬猫和进行疫苗注射、身体检查的健康犬猫，主要采集其皮肤及外耳道拭子样品，然后对其进行细菌分离鉴定。

2.2 质控菌和标准菌株

金黄色葡萄球菌标准株ATCC29213。

2.3 方法
按照美国临床实验室标准化委员会（CLSI）推荐的琼脂稀释法操作程序进行[9]。

3 结果

采用琼脂稀释法对133株葡萄球菌进行药敏试验，参照CLSI标准对药敏结果进行判断。结果表明宠物源葡萄球菌耐药性比较严重（见表1及图1）。耐药性最严重的是四环素、青霉素和克林霉素，耐药率达70%以上；其次是氟苯尼考和环丙沙星，耐药率为59%和45%；对恩诺沙星和氯霉素耐药率稍低，为37%；敏感性较高的是万古霉素、头孢唑啉和庆大霉素，分别为1%、1%和8%。其中121株葡萄球菌至少对一种抗菌药耐药，除12株菌仅对一种抗菌药耐药，其余109株菌出现多重耐药性，其中2株菌同时对10种抗菌药耐药。图2的耐药数量分段比较显示出同时耐4~6种抗菌药的菌株比较多（42%），其次是耐1~3种和耐7~9种抗菌药的菌株，各占18%和29%，仅有9%菌株不出现耐药情况。

4 分析与讨论

4.1葡萄球菌的耐药性分析

本研究分离的133株葡萄球菌中有121株至少对一种抗菌药物耐药，且对12种抗菌药的大部分都表现比较高的耐药率，耐药情况比较严重。

四环素的耐药率达77%，这可能与四环素类药物使用史较长，四环素类药物之间存在交叉耐药有关。在广州及深圳的宠物临床治疗中，四环素类药物（包括多西环素、土霉素、金霉素等）的使用并不鲜见。

恩诺沙星及环丙沙星属于氟喹诺酮类药物，作用于细菌的DNA回旋酶，干扰DNA的复制使细菌死亡，具有强大的杀菌作用，抗菌谱广，体内分布广泛，并且毒副作用少，安全范围大，是临床上比较理想的抗菌药物，但本类药物之间存在交叉耐药[10]。事实上，随着国外的小动物专用药的进口，国内此类药物种类越来越多，目前宠物兽医门诊使用氟喹诺酮类药物呈上升趋势。本研究中结果显示，分离所得的葡萄球菌对其耐药性不低，这可能与药物的使用增多有关。

青霉素、苯唑西林以及头孢唑啉都属于β-内酰胺类抗生素。已经证明β-内酰胺类抗生素可与几种存在于细菌细胞质膜上，参与细胞壁合成的酶（羧肽酶、转肽酶、内肽酶）相结合。不同的β-内酰胺类抗生素对这些酶（也称青霉素结合蛋白，PBPs）具有不同的亲和力，这有助于解释为什么不同药物具有的抗菌谱不同，或者细菌耐药率的不同。本研究中，青霉素的耐药率达72%，但是苯唑西林耐药率为17%，而头孢唑啉的耐药率仅为1%。同时了解到采集样品的医院中，头孢唑啉和苯唑西林的使用率都很低，而青霉素有较长的使用史，这可能与其耐药率不同有关。

克林霉素属于林可胺类药物，在小动物临床中使用率较高。大环内酯类包括的红霉素、阿奇霉素等在宠物临床上也是经常使用的，林可胺类药物和大环内酯类都作用于细菌50S核糖体亚基，它们之间存在部分交叉耐药，这可能是本研究中的克林霉素耐药率达70%的原因。

本研究中庆大霉素的耐药率比较低，只有8%，这与其他研究的结果有所不同。庆大霉素属于氨基糖苷类药物，抗菌谱较广，在阳性菌中，对耐药的葡萄球菌亦有效。同时由于庆大霉素的肾毒性，使得在小动物临床上比较慎重地使用，使用率比以前有所下降。庆大霉素耐药菌株的耐药性维持时间较短，停药一段时间后易恢复其敏感性，这可能可以解释本研究与其他研究结果不同的原因。

万古霉素为糖肽类抗生素，可抑制细菌细胞壁的合成，主要用于治疗多重耐药葡萄球菌的感染。其抗菌作用较强，但有肾毒性和耳毒性，在其他抗生素对病菌无效时才会被使用，也就是所谓的最后一线药物。在采集样品的兽医院中，并没有使用过万古霉素。本研究中万古霉素的耐药率仅1%。

在样品资料中发现，耐8种抗菌药以上（包括8种）的多重耐药菌株除了一小部分样品病史不详之外，有一部分是现患或曾患皮肤病的，另外一部分是现患或曾患病程较长的疾病，提示其耐药性的发生可能与长期或不合理的抗菌药用药史有关。

综上所述，本次研究所分离的葡萄球菌对万古霉素、头孢唑啉和庆大霉素的敏感性最高。薛占永（2008）报道了88株来自犬脓皮病患犬的葡萄球菌对抗生素的敏感性，其中对万古霉素的敏感性达100%，对苯唑西林的敏感性94.3%，环丙沙星、恩诺沙星的敏感性为82.9%，庆大霉素敏感性70.5%，但是对青霉素的敏感性只有29.5%，四环素的敏感性22.7%，总体结果跟本研究的结果基本相似。

4.2 与国外宠物源葡萄球菌耐药性的比较

Pedersen等（2007）报道了从2000年到2005年在丹麦兽医诊所采集样本中葡萄球菌的研究结果。结果表明，中间型葡萄球菌有60.2%对青霉素耐药，30.2%对夫西地酸耐药，27.9%对大环内酯耐药。2006年瑞典兽医耐药性监测报告中指出，犬的中间型葡萄球菌有16%对克林霉素耐药、24%对红霉素耐药、23%对夫西地酸耐药、29%对链霉素耐药、37%对四环素耐药。

Hauschild等（2007）在波兰从患有皮肤病的犬中分离出多种葡萄球菌，87.5%的菌株至少对一种药有耐药性，其中对头孢菌素类、庆大霉素和阿莫西林/克拉维酸有很高的敏感性，但对阿莫西林、氨苄西林、红霉素、克林霉素、新霉素等的耐药性高。以上数据与本研究的结果相比较，虽然有差异，但是基本上表现为对青霉素、四环素耐药率比较高，而对头孢菌素、庆大霉素较为敏感，而且发现多重耐药菌株并不鲜见。

4.3 临床用药指导作用

由样品的来源考虑，分离所得的菌株主要来自皮肤和外耳道，其测得的药物敏感性，可能可用于指导宠物临床皮肤病的用药。目前，某公司有几款兽用耳药复方制剂中含有庆大霉素，提示着庆大霉素对外耳道细菌感染有较好的疗效。根据本研究的结果，对于犬猫感染葡萄球菌的皮肤病，庆大霉素可能有较好的疗效。对于一些比较严重的葡萄球菌感染病例，在其他抗生素治疗效果都不明显的情况下，可以考虑静注万古霉素。但是要密切监控动物的肾功能及血清药物水平，对于肾功能不全的动物，使用万古霉素治疗时应减少剂量和延长给药间隔。

5 小结

本研究表明，目前广州深圳地区宠物源的葡萄球菌对抗菌药物的耐药性比较严重，应该引起宠物临床兽医师的重视，减少滥用和无指征用药，提高公共卫生安全意识。宠物源的其他细菌的耐药性情况同样严重，因此，有关部门应该重视伴侣动物细菌耐药性的问题，对宠物的细菌进行耐药性监测并制订抗菌药使用规范，以指导临床合理用药和减少对人类健康造成的不良影响。